দূষণের পরে কলামটি কীভাবে পরিষ্কার এবং পুনরুত্পাদন করবেন?
? ? ? ? ? ? ? ?
Date:2021-11-25 16:42:09 Thursday
Summary: যখন একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম দূষিত হয়, তখন এর ক্রোমাটোগ্রাফিক আচরণ একটি দূষিত কলামের থেকে কিছুটা আলাদা হবে। দূষিত কলাম পিঠে চাপের সমস্যা সৃষ্টি করতে পারে। দূষিত রিভার্সড-ফেজ কলামটি অবশ্যই পরিষ্কার করতে হবে এবং মূল অপারেটিং অবস্থা পুনরুদ্ধার করত......
যখন একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম দূষিত হয়, তখন এর ক্রোমাটোগ্রাফিক আচরণ একটি দূষিত কলামের থেকে কিছুটা আলাদা হবে। দূষিত কলাম পিঠে চাপের সমস্যা সৃষ্টি করতে পারে। দূষিত রিভার্সড-ফেজ কলামটি অবশ্যই পরিষ্কার করতে হবে এবং মূল অপারেটিং অবস্থা পুনরুদ্ধার করতে পুনরায় তৈরি করতে হবে। একটি দূষিত এইচপিএলসি কলাম পুনরুত্পাদনের চাবিকাঠি হল দূষকটির প্রকৃতি জানা এবং এটি অপসারণের জন্য একটি উপযুক্ত দ্রাবক খুঁজে বের করা। বারবার ইনজেকশন দেওয়ার সময় দূষিত পদার্থগুলি দৃঢ়ভাবে ধরে রাখার কারণে যদি দূষণ ঘটে, তবে এই দূষকগুলি অপসারণের সহজ পদক্ষেপগুলি প্রায়শই ক্রোমাটোগ্রাফিক আচরণকে পুনরুদ্ধার করতে পারে। কখনও কখনও, অনেকগুলি অপারেশনের পরে, ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামটি 90-100% দ্রাবক বি (দুই-দ্রাবক বিপরীত ফেজ সিস্টেমে শক্তিশালী দ্রাবক) দিয়ে 20 ভলিউম দূষিত পদার্থগুলি দূর করার জন্য ধুয়ে ফেলা হয়। উদাহরণস্বরূপ, মিথানল, অ্যাসিটোনিট্রিল এবং টেট্রাহাইড্রোফুরানের মতো অ-জলীয় দ্রাবকগুলি কলামের অবশিষ্ট লিপিডগুলির জন্য ব্যবহার করা যেতে পারে। সাধারণভাবে বলতে গেলে, সমস্ত পরিষ্কারের পদ্ধতির একই রূপ রয়েছে। ব্যবহৃত দ্রাবক দ্রাবক শক্তি বৃদ্ধি পায়. প্রায়শই শেষ দ্রাবকটি খুব হাইড্রোফোবিক (যেমন ইথাইল অ্যাসিটেট বা এমনকি হাইড্রোকার্বন) এবং লিপিড এবং তেলের মতো অ-মেরু পদার্থ দ্রবীভূত করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। আমাদের অবশ্যই নিশ্চিত করতে হবে যে দ্রাবকের একটি সিরিজের প্রতিটি দ্রাবক পরবর্তী দ্রাবকের সাথে মিশ্রিত করা যেতে পারে। পরিষ্কারের প্রক্রিয়া শেষে, একটি মাঝারি-শক্তির মিসসিবল দ্রাবকের সাহায্যে মূল দ্রাবক সিস্টেমে ফিরে আসা প্রয়োজন। উদাহরণ স্বরূপ, মধ্যবর্তী ধাপ হিসেবে আইসোপ্রোপ্যানল একটি খুব ভালো দ্রাবক কারণ এটি এন-হেক্সেন বা ডাইক্লোরোমেথেনের সাথে মিশ্রিত এবং পানির ফেজ দ্রাবকের সাথেও। যাইহোক, আইসোপ্রোপ্যানলের সান্দ্রতা খুব বেশি, এবং অত্যধিক পাম্পের চাপ এড়াতে কম প্রবাহ হার নিশ্চিত করতে হবে। ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামটি ফ্লাশ করার সময়, ফ্লাশিং তরলটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামের আউটলেট প্রান্ত থেকে বর্জ্য বোতলের সাথে সরাসরি সংযুক্ত থাকে এবং সনাক্তকরণ কোষের দূষণ এড়াতে সনাক্তকরণ কোষের মধ্য দিয়ে প্রবাহিত হতে পারে না। রিভার্সড-ফেজ ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম বাফার দ্রবণ ব্যবহার করে না, অনুগ্রহ করে পুনর্জন্মের জন্য নিম্নলিখিত দ্রাবক সিরিজ ব্যবহার করুন: 100% মিথানল → 100% অ্যাসিটোনিট্রাইল → 75% অ্যাসিটোনিট্রিল-25% আইসোপ্রোপ্যানোল → 100% আইসোপ্রোপ্যানোল → 100% মিথিলিন ক্লোরাইড → 100% এন-হেক্সেন → 100% মিথাইলিন 100% ক্লোরাইড → 100% মিথাইলিন রিভার্স ফেজ ক্রোমাটোগ্রাফি কলাম বাফার দ্রবণ ব্যবহার করে, অনুগ্রহ করে পুনরুত্থিত করতে নিম্নলিখিত দ্রাবক সিরিজ ব্যবহার করুন: জল → অ্যাসিটোনিট্রিল → ক্লোরোফর্ম (বা আইসোপ্রোপ্যানল) → অ্যাসিটোনিট্রিল → জল.