Summary: একটি পরীক্ষাগার একটি নতুন কোষ লাইন প্রাপ্ত করার পরে, কোষ লাইন প্রথমে সংষ্কৃত এবং প্রসারিত এবং তারপর হিমায়িত করা আবশ্যক। কোষের cryopreservation প্রথমে ব্যাকআপ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে যখন কোষগুলি দূষণ এবং অন্যান্য অবস্থার কারণে হারিয......
একটি পরীক্ষাগার একটি নতুন কোষ লাইন প্রাপ্ত করার পরে, কোষ লাইন প্রথমে সংষ্কৃত এবং প্রসারিত এবং তারপর হিমায়িত করা আবশ্যক। কোষের cryopreservation প্রথমে ব্যাকআপ হিসাবে ব্যবহার করা যেতে পারে যখন কোষগুলি দূষণ এবং অন্যান্য অবস্থার কারণে হারিয়ে যায়। উপরন্তু, প্রায় সমস্ত কোষ সংস্কৃতি এবং উত্তরণ প্রক্রিয়ার সময় একটি নির্দিষ্ট মাত্রার পরিবর্তনের মধ্য দিয়ে যায়। পরীক্ষামূলক ফলাফলের ধারাবাহিকতা বজায় রাখার জন্য, সাধারণত কয়েক ডজন প্রজন্মের জন্য কোষগুলিকে সংস্কৃতি করা যায় না। যদি এটি আবার ব্যবহার করা হয়, তবে ব্যবহারের আগে ক্রিওপ্রিজারভড, কম প্যাসেজড কোষগুলিকে গলানো এবং কালচার করা প্রয়োজন।
কোষ জমাকরণ প্রক্রিয়ায় চারটি প্রধান বিষয় রয়েছে: কোষ সংগ্রহ, প্রতিরক্ষামূলক এজেন্ট ব্যবহার, হিমায়িত হার এবং স্টোরেজ পরিবেশ।
কোষ ফসল
ক্রিওপ্রিজারভেশনের জন্য ব্যবহৃত কোষগুলি সাধারণত নির্বাচন করা হয় যখন কোষগুলি প্রায় 90% মিলিত হয়। এই সময়ে, কোষের বৃদ্ধি ভাল হয় এবং কোষের সংখ্যা বেশি হয় এবং কোষ সংগ্রহের 24 ঘন্টা আগে সংস্কৃতির মাধ্যম পরিবর্তন করতে হবে। ক্রায়োপ্রিজারভেশনের জন্য কোষ সংগ্রহের পদ্ধতি স্বাভাবিকের মতোই। 5 মিনিটের জন্য 100xg এ সেন্ট্রিফিউজ করুন কোষগুলি সংগ্রহ করতে এবং তাদের পুনরায় চালু করতে। জীবিত কোষ গণনা করা হয়. কোষ সংরক্ষণের জন্য চূড়ান্ত কোষের ঘনত্বের দ্বিগুণ পাতলা করুন বা ঘনীভূত করুন (সাধারণত 4-10 মিলিয়ন কোষ/মিলি), একটি সমান আয়তনের কালচার মিডিয়াম প্রোটেক্টিভ এজেন্ট মিশ্রণের দ্রবণ যোগ করুন যা প্রস্তুত করা হয়েছে, এবং আলতোভাবে মিশ্রিত করুন, এবং ক্রায়োপ্রিজারভেশন টিউবের সাথে অ্যালিকোট করুন, cryopreservation
প্রতিরক্ষামূলক এজেন্ট ব্যবহার।
কোষ cryopreservation, DMSO সাধারণত একটি প্রতিরক্ষামূলক এজেন্ট হিসাবে ব্যবহৃত হয়। সেল ক্রিওপ্রিজারভেশনে, ব্যবহৃত DMSO এর চূড়ান্ত ঘনত্ব সাধারণত 5-15% হয়। একটি নির্দিষ্ট কোষের cryopreservation সমাধানে DMSO এর ঘনত্ব ATCC থেকে পাওয়া যেতে পারে। বিশেষ করে সংবেদনশীল কোষের জন্য, বিশেষ করে হাইব্রিডোমা কোষের জন্য, ক্রায়োপ্রেসারিং করার সময় 95% সিরাম এবং 5% DMSO ব্যবহার করা ভাল হতে পারে। প্রতিরক্ষামূলক এজেন্ট ব্যবহার করার সময়, দ্বিগুণ চূড়ান্ত ঘনত্ব তৈরি করতে কালচার মিডিয়াম বা সিরাম ব্যবহার করুন এবং তারপর সাসপেনশন সেল কালচার মিডিয়ামের সমান আয়তনের সাথে এটি মিশ্রিত করুন। সেল হিমায়িত হার
অত্যধিক ডিহাইড্রেশন দ্বারা ক্ষতিগ্রস্থ না হয়ে কোষগুলিকে ডিহাইড্রেট করার জন্য পর্যাপ্ত সময় দেওয়ার জন্য কোষের হিমায়িত হার সর্বোত্তমভাবে নিয়ন্ত্রিত হয়। বেশিরভাগ কোষের জন্য, প্রতি মিনিটে 1 থেকে 3 ডিগ্রি সেলসিয়াসের তাপমাত্রা হ্রাস উপযুক্ত। স্বাভাবিক অপারেশন হল কোষগুলিকে 1-2 ঘন্টার জন্য -20 ডিগ্রি সেলসিয়াসে রাখা, তারপরে সেগুলিকে রাতারাতি -80 ডিগ্রি সেলসিয়াস রেফ্রিজারেটরে রাখা (যদি -80 ডিগ্রি সেলসিয়াস রেফ্রিজারেটর না থাকে তবে আপনি পরিবর্তে শুকনো বরফ ব্যবহার করতে পারেন) এবং তারপর তরল নাইট্রোজেন ট্যাঙ্কে স্থানান্তর করুন বা -130 এর নিচে ফ্রিজে দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ ℃ এ।
স্টোরেজ পরিবেশ
কোষের দীর্ঘমেয়াদী স্টোরেজ তাপমাত্রা -130 ℃ বা কম। তরল নাইট্রোজেন ট্যাঙ্কে গ্যাসীয় স্তরের তাপমাত্রা -140 ℃ এবং -180 ℃ মধ্যে। কোষগুলিকে গ্যাসীয় স্তরে সংরক্ষণ করা যেতে পারে বা তরল নাইট্রোজেনে নিমজ্জিত করা যেতে পারে। যদি সম্ভব হয়, বায়বীয় স্তরে সংরক্ষণ করা ভাল, কারণ এটি তরল নাইট্রোজেনকে হিমায়িত সঞ্চয়স্থানে প্রবেশ করা এড়াতে পারে। কোষগুলি বের করে নেওয়া হলে টিউবটি একটি বিস্ফোরণ ঘটায় (কিন্তু এইভাবে, তরল নাইট্রোজেন ট্যাঙ্কে শুধুমাত্র অল্প পরিমাণে তরল নাইট্রোজেন সংরক্ষণ করা যেতে পারে, যা ঘন ঘন যোগ করা প্রয়োজন)। কোষগুলিকে কয়েক মাস বা তারও বেশি সময়ের জন্য -80℃ তাপমাত্রায় রেফ্রিজারেটরে সংরক্ষণ করা যেতে পারে।
英语
阿拉伯语
���ļ���