কিভাবে সঠিক কলাম নির্বাচন করবেন?
? ? ? ? ? ? ? ?
Date:2021-11-04 17:32:46 Thursday
Summary: ① ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম প্যাকিং ম্যাট্রিক্স A. সিলিকা জেল ম্যাট্রিক্স: উচ্চ বিশুদ্ধতা, কম খরচ, উচ্চ শক্তি, সহজ রাসায়নিক পরিবর্তন, কিন্তু pH পরিসীমা সীমিত। বেশিরভাগ সিলিকা ম্যাট্রিক্স ফিলার pH 2-8 এর মধ্যে স্থিতিশীল, তবে বিশেষভাবে পরিবর্তিত সিল......
① ক্রোমাটোগ্রাফিক কলাম প্যাকিং ম্যাট্রিক্স
A. সিলিকা জেল ম্যাট্রিক্স: উচ্চ বিশুদ্ধতা, কম খরচ, উচ্চ শক্তি, সহজ রাসায়নিক পরিবর্তন, কিন্তু pH পরিসীমা সীমিত। বেশিরভাগ সিলিকা ম্যাট্রিক্স ফিলার pH 2-8 এর মধ্যে স্থিতিশীল, তবে বিশেষভাবে পরিবর্তিত সিলিকা জেল বন্ডেড ফেজ pH 1.5-10 এ স্থিতিশীল হতে পারে।
B. পলিমার ম্যাট্রিক্স: ব্যাপক প্রয়োগের pH পরিসর, স্থিতিশীল তাপমাত্রা (উচ্চ তাপমাত্রা 80 ডিগ্রির উপরে পৌঁছাতে পারে), এবং কম যান্ত্রিক শক্তি।
②কণা আকৃতি
বেশিরভাগ আধুনিক এইচপিএলসি ফিলারগুলি গোলাকার কণা, তবে কখনও কখনও অনিয়মিত কণা। গোলাকার কণা নিম্ন কলাম চাপ, উচ্চ কলাম দক্ষতা এবং স্থায়িত্ব, এবং দীর্ঘ কলাম জীবন প্রদান করে। একটি উচ্চ-সান্দ্রতা সক্রিয় ফেজ ব্যবহার করার সময়; অনিয়মিত কণাগুলির একটি বৃহত্তর নির্দিষ্ট পৃষ্ঠ এলাকা এবং তুলনামূলকভাবে কম দাম রয়েছে।
③কণার আকার
কণার আকার যত ছোট হবে, দক্ষতা তত বেশি হবে এবং রেজোলিউশনও তত বেশি হবে, তবে একই সময়ে এটি কলামের চাপের ড্রপের দিকে নিয়ে যাবে। কিছু জটিল নমুনা সমাধান করতে 1.5-3μm প্যাকিং উপাদান চয়ন করুন, UPLC 1.5μm প্যাকিং ব্যবহার করতে পারে; আরেকটি 10μm বা বড় কণা আকারের প্যাকিং আধা-প্রস্তুতিমূলক বা প্রস্তুতিমূলক কলাম হিসাবে ব্যবহৃত হয়।
④ কার্বন সামগ্রী
একটি ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামের কার্বন বিষয়বস্তু সিলিকা জেলের পৃষ্ঠে বন্ডেড ফেজের অনুপাতকে বোঝায়, যা নির্দিষ্ট পৃষ্ঠ এলাকা এবং বন্ধন কভারেজের সাথে সম্পর্কিত। উচ্চ কার্বন সামগ্রী কলামের ক্ষমতা, রেজোলিউশন এবং বিশ্লেষণের সময় উন্নত করে এবং উচ্চ রেজোলিউশনের প্রয়োজন এমন জটিল নমুনার জন্য ব্যবহৃত হয়; কম কার্বন সামগ্রীর একটি সংক্ষিপ্ত বিশ্লেষণের সময় থাকে এবং বিভিন্ন নির্বাচনীতা প্রদর্শন করে এবং সহজ নমুনা এবং উচ্চ জল-ধারণকারী সক্রিয় পর্যায়গুলির দ্রুত বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়। অবস্থার নমুনা। সাধারণত, C18 এর কার্বনের পরিমাণ 7-19% পর্যন্ত হয়ে থাকে।
⑤ ছিদ্র আকার এবং নির্দিষ্ট পৃষ্ঠ এলাকা
এইচপিএলসি শোষণের মাধ্যম হল ছিদ্রযুক্ত কণা, এবং বেশিরভাগ প্রতিক্রিয়া পৃষ্ঠ ছিদ্রগুলিতে থাকে। অতএব, অণুগুলিকে শোষণ এবং পৃথক করার জন্য ছিদ্রগুলিতে প্রবেশ করতে হবে।
ক্রোমাটোগ্রাফিক কলামের ছিদ্রের আকার এবং নির্দিষ্ট পৃষ্ঠের ক্ষেত্রফল দুটি পরিপূরক ধারণা। ছিদ্র আকার ছোট এবং নির্দিষ্ট পৃষ্ঠ এলাকা বড়, এবং তদ্বিপরীত. বড় নির্দিষ্ট পৃষ্ঠ এলাকা, নমুনা এবং বন্ধন পর্যায়ের মধ্যে প্রতিক্রিয়া বৃদ্ধি, সঞ্চয়স্থান বৃদ্ধি, নমুনা লোডিং, এবং জটিল উপাদান পৃথকীকরণ; ছোট নির্দিষ্ট পৃষ্ঠ এলাকা, দ্রুত ভারসাম্যের সময়, গ্রেডিয়েন্ট বিশ্লেষণের জন্য উপযুক্ত।
⑥ ছিদ্র ভলিউম এবং যান্ত্রিক শক্তি
ছিদ্র ভলিউম, যা "পোর ভলিউম" নামেও পরিচিত। প্রতি কণার অকার্যকর আয়তনের আকার বোঝায়। এটি ফিলারের যান্ত্রিক শক্তিকে ভালভাবে প্রতিফলিত করতে পারে। বড় ছিদ্রযুক্ত ফিলারগুলির ছোট ছিদ্র ভলিউমের তুলনায় সামান্য দুর্বল যান্ত্রিক শক্তি থাকে। 1.5 mL/g বা তার কম ছিদ্রযুক্ত ফিলারগুলি বেশিরভাগ HPLC পৃথকীকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়, যখন 1.5 mL/g-এর বেশি ছিদ্রযুক্ত ফিলারগুলি আকার বর্জন ক্রোমাটোগ্রাফি এবং নিম্ন চাপের ক্রোমাটোগ্রাফির জন্য ব্যবহৃত হয়।
⑦ শেষ ক্যাপ
কলাম এন্ড ক্যাপিং এক্সপোজড সিলানল গ্রুপের সাথে মিথস্ক্রিয়ার কারণে মেরু মৌলিক যৌগের লেজ পিক কমাতে পারে। অবরুদ্ধ বন্ধন পর্যায়ের ব্লকড বন্ডেড ফেজের তুলনায় আলাদা নির্বাচনীতা থাকবে, বিশেষ করে মেরু নমুনার জন্য।